PAGE預混快速凝膠試劑盒

產(chǎn)品描述

本產(chǎn)品是在傳統(tǒng)的PAGE凝膠試劑盒的基礎上改良的一種新型蛋白電泳凝膠試劑盒。其特點是在不改變傳統(tǒng)使用習慣和蛋白質(zhì)分子的分離環(huán)境的基礎上，改善了引發(fā)劑過硫酸銨的使用條件，實現(xiàn)了一步法灌膠，灌制下層膠后直接注入上層膠，無需液封，大大簡化了凝膠的制備方法，并提高了電泳的速度（室溫環(huán)境，加入正常比例APS，10-15min即可凝固），有利于獲得好的蛋白電泳實驗結果。

訂購信息

產(chǎn)品組分

u  下層膠為分離膠，上層膠為濃縮膠。

運輸與保存

常溫運輸。4℃保存，有效期12個月。【注】：過硫酸銨溶液分裝后-20℃保存。

使用方法（可參考文末簡圖）

1.試劑準備

(1)     10% 過硫酸銨（APS）溶液的配制：初次使用時，向APS試管中加入5 mL去離子水，輕輕搖勻混合，分裝存儲于-20℃，短期使用的置于4℃保存。【注】：若0.1g的APS則加入1mL去離子水即可。

(2)     下層膠混合液的準備：根據(jù)所使用的制膠模具，取所需量1/2體積的下層膠A液和下層膠B液于同一小燒杯（或試管）中混合均勻。【例】：使用伯樂Mini-PROTEAN電泳槽制膠時，按0.75/1.0/1.5 mm厚度的膠板，下層膠A液和B液分別取2.0/2.5/3.8 mL。

(3)     上層膠混合液的準備：另取一小燒杯，分別取所需量1/2體積的上層膠A液和B液，混合均勻備用。【例】：使用伯樂Mini-PROTEAN電泳槽時，按0.75/1.0/1.5 mm厚度的膠板，上層膠A液和B液分別取0.8/1.0/1.5 mL。

(4)     APS的加入：按1:100的比例，在步驟(2)和(3)中制備的下層膠和上層膠混合液中，分別加入10% APS溶液（即每1mL凝膠混合液中加入10μL的10% APS溶液）。輕輕攪拌混勻，避免產(chǎn)生氣泡。

2.灌膠操作

(1)     灌膠：將上一步準備好的下層膠混合液倒入凝膠模具中（如使用伯樂Mini-PROTEAN電泳槽時，凝膠液加至約距前玻璃板頂端1.5cm或距梳齒約0.5cm即可）。無需等待，可立即將已經(jīng)準備好的濃縮膠混合液從左至右輕軟打入或倒入模具內(nèi)，避免在一個位置大力度沖擊進入。

(2)     插梳與聚合：將梳子插入凝膠內(nèi)，靜置10-15min，等待凝膠聚合。【注】：制備好的凝膠放入加有少量電泳緩沖液的密封袋中，可于4℃存放數(shù)周。

3.電泳操作

(1)     待凝膠聚合后，組裝電泳槽，加入電泳緩沖液，小心地拔出梳子，檢查膠孔并整理梳齒。

(2)     根據(jù)實驗需要加入蛋白樣品和蛋白分子量標準。

(3)     調(diào)整電泳儀為恒壓200V-300V，進行電泳操作，約25-35min完成蛋白電泳實驗。【注】：單板膠電流大于90mA，雙板膠電流大于130mA可以適當降低電壓。

注意事項

1.     本產(chǎn)品僅限于科學實驗研究使用，不得用于臨床診斷、治療等領域。
2.     本產(chǎn)品與傳統(tǒng)的SDS-PAGE有本質(zhì)上的區(qū)別，請按產(chǎn)品說明書操作，操作視頻和預混膠分離圖譜示意圖可以參考GW或者聯(lián)系技術。
3.     灌注上層膠溶液時應操作輕緩，避免定點灌注，以防上層膠溶液過度滲入下層膠中。
4.     凝固后的膠，上下層膠的分界線平整度略低于傳統(tǒng)配制方法，但不影響后續(xù)電泳效果。

5.     配制的過硫酸銨應存儲于-20℃，若保存于4℃，建議1周內(nèi)使用。

6.     試劑中含有Acr-Bis，該試劑有神經(jīng)毒性，小心使用。

可制備凝膠數(shù)量

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